روش ارزیابی فعالیت مهارکننده های خاموشی ژن در گیاه با استفاده از دو پروتئین از ویروس برگ بادبزنی مو (gflv)

مهارکننده­ های rna silencing در گیاهان، جانوران و بیشتر ویروس­های بیماری­زای گیاهی به خوبی توصیف شده­اند و نیز شیوه شناسایی فعالیت مهارکنندگی خاموشی ژن یک پروتئین در سیستم گیاهی راه اندازی شده است. ویروس برگ بادبزنی مو (gflv) grapevine fanleaf virus  یکی از شایع­ترین ویروس­های شناخته شده مو در سراسر دنیا است که تا 80 درصد خسارت می­زند. این ویروس دوپیکره­ای با ژنوم rna تک رشته­ای در جنس nepovirus و خانواده secoviridae قرار دارد. ژن مهارکننده­ خاموشی در نپوویروس­ها هنوز شناسایی نشده است و دانش ما از تعیین کننده­ های علایم و مهارکننده ­های خاموشی ویروس­های این جنس خیلی محدود است. در این پژوهش ژن gfp در گیاهان nicotiana benthamiana تراریخته با gfp خاموش شد و سپس توانایی پروتئین­های پلیمراز (rdrp) و حرکتی gflv در مهار سازوکار rna silencing ارزیابی شد. عملکرد این دو پروتئین با شاهدهای مثبت و منفی به کاربرده شده مقایسه شد و نتایج نشان داد که اگرچه این دو پروتئین در بروز علایم و سیستمیک شدن بیماری نقش دارند اما کارایی لازم را جهت مهارکنندگی خاموشی ندارند. این پژوهش مدل بررسی فعالیت ممانعت کنندگی از rna silencing را بیان می­نماید.